ヒト副腎皮質腫瘍の ACTH 反応性に関する研究 –臨床観察ならびに実験的考察–
大阪大学医学部内科学第二教室 長谷川恭一,森脇 要,五十嵐 暢,菅瀬 透 川上 房男,伊藤 芳晴,西川 光夫
Studies on the Responsiveness of Human Adrenocortical Tumors to ACTH
-The Clinical and Experimental Observations ---
Kyoichi HASEGAWA, Kaname MORIWAKI, Tohru IGARASHI, Tohru SUGASE, Fusao KAWAKAMI, Yoshiharu ITOH and Mitsuo NISHIKAWA
The Second Department of Internal Medicine, Osaka University Medical School, Osaka.
Six cases of Cushing’s syndrome with adrenocortical tumors which showed a variety of responsiveness to ACTH were investigated in relation to their clinical pictures and laboratory findings. Abnormal responses to ACTH in tumors was analyzed by in vitro experiments with surgically obtained tumor tissues, and the ACTH responsive me- chanism of the tumors was discussed.
An 8 hour intravenous ACTH infusion test showed that three of these patients were ACTH responsive, and the other three unresponsive. Histological observation of the tumors revealed that ACTH responsive tumors were adenomas and that ACTH unres- ponsive tumors were “black adenomas” in two and a carcinoma in one.
To investigate possible factors which might account for these differences in ACTH responsiveness, tumor specimens of each one of the responsive and unresponsive adeno- mas, and a carcinoma were subjected to in vitro studies. When incubated with ACTH or cyclic AMP, tissue sections of a responsive adenoma enhanced cortisol secretion, while that of a black adenoma failed to show any change. Steroidogenesis by carcinoma sections were significantly suppressed in the presence of ACTH or cyclic AMP.
Cycloheximide abolished a stimulatory effect of ACTH and cyclic AMP on steroido- genesis in a responsive adenoma without affecting its basal secretion of cortisol. Ste- roidogenesis by unresponsive tumors (an adenoma and a carcinoma) were decreased by cycloheximide.
Since the conversion of cholesterol to pregnenolone, the rate limiting step in ste- roidogenesis, takes place in adrenal mitochondria, the effect of cyclic AMP on pregne-
nolone formation from 14C-cholesterol by mitochondrial fractions of these tumors was examined. Cyclic AMP stimulated pregnenolone formation by mitochondrial fraction of an ACTH responsive adenoma, while with that of an unresponsive adenoma pregne- nolone formation was not affected. Pregnenolone formation by cancer mitochondria was significantly suppressed by cyclic AMP.
These results suggest that the unresponsiveness to ACTH of these tumors might be explained by the ineffectiveness of cyclic AMP to stimulate pregnenolone formation by tumor mitochondria, and that the steroidogenic pathway in unresponsive tumors are in an enhanced state even without cyclic AMP.
It should be mentioned that all unresponsive adenomas gave a characteristic ap- pearance of a “black adenoma”. Histologically, tumors were composed of compact cells with abundant lipofuscin granules. The possible relationship between the ACTH responsiveness of adrenocortical tumors and some clinical pictures caused by them was also noticed. ACTH unresponsive adenomas resulted in shorter duration, severer conditions of the disease and higher 17-ketosteroid excretion than responsive adenomas. The growth of unresponsive tumors seemed faster than that of responsive ones.
は じ め に
臨床上 Cushing 症候群を呈する cortisol 分泌性副腎皮質腫瘍は、組織学的には,腺腫と癌腫とに分けら れ、また ACTH に反応するものとしないものとがある、 一般に、癌腫では ACTH に反応しないとされて おり,腺腫では反応するものとしないものとがある。 このような ACTH に対する反応性の相違が,何に起 因しているかは、未だつきとめられていない.副腎における ACTH の作用機構に関しては,まず second messenger としての cyclic AMP や, Ca++ などが重要な役割を果していることを示す報告6)71)は少なく なく、また、その作用部位としては, ステロイド合成の 律速段階である cholesterol から pregnenolone を産生する過程が考えられている10. 更に, cycloheximide などの蛋白合成阻害剤が ACTH 作用を抑制 することから、ある種の蛋白性因子が関与していることも示唆されている3). しかし、このように部分的な 知見はかなり加えられたにかかわらず, ACTH の作用を細部にわたって統一的に把握し得る段階には未だ 到達していない. ACTH 作用の詳細な機構が明らかでない現在,副腎皮質腫瘍の ACTH 反応機構異常の 完全な理解も困難であるといわねばならないが、腫瘍の反応動態の異常を分析することは、逆に ACTH の 作用機構を考察する手がかりを得ることにもつながると考えられる.
著者らは,このような観点から,副腎皮質腫瘍の ACTH 反応性に注目し,反応性の異なる副腎皮質腫瘍 の臨床検査成績を分析するとともに、手術により得られた腫瘍組織を対象として、試験管内で ACTH 反応 性についての実験を行なつた. すなわち,ACTH 反応性および 不反応性腺腫,と癌腫の組織切片につい て、そのステロイド産生に及ぼす ACTH や cyclic AMP, cycloheximide などの効果, ならびに腫瘍細 胞ミトコンドリアに対する cyclic AMP の作用などを観察し、臨床観察と対比しつつ,その ACTH 反応 機構に考察を加えた.
検査および実験方法,材料
(1) 臨床観察および検査法
症例は, Table 1 に示した Cushing 症候群を呈する副腎皮質腫瘍6例である. 尿中 170HCS は Porter-
第51巻 第9号
| ACTH 反応性腺腫 | ACTH 不反応性腺腫 | 癌 腫 | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 症 例,年 令,性 別 | (1) M. I. 49 M | (2) H. N. 40 F | (3) S. Y. 24 F | (4) T. M. 35 F | (5) M. I. 24 F | (6) I. T. 20 M |
| 発 病 か ら の 期 間 | 90ヶ月 | 60ヶ月 | 36~60ヶ月 | 50ヶ月 | 36ヶ月 | 12ヶ月 |
| 自 覚 症 状 | 浮腫感,肥 満 | 頭痛,多飲,多尿 | 紫斑,脱力感,無 月経 | 体重增加,無月経 | 紫斑,腰痛,無月 経 | 多飲,多尿,易疲 労感 |
| 臨 床 所 見 | 満月様顔貌(軽度) 四肢出血斑,抑う つ状態 | 満月様顔貌,中心 性肥満,下肢出血 斑(軽度) | 満月様顔貌,胸腹 部赤色皮膚線条, 下肢出血斑,痤瘡 情動不穩 | 満月様顔貌,中心 性肥満,腹部赤色 皮膚線条,下肢出 血斑(多数),多毛 | 満月様顔貌,腹部 赤色皮膚線条,下 肢出血斑,痤瘡, 多毛 | 満月様顔貌,中心 性肥満,腹部,側 胸部赤色線条,痤 瘡,多毛 |
| 血圧 150/100 | 142/100 | 190/120 | 176/130 | 180/110 | 140/86 | |
| 一 般 検 査 所 見 耐糖 曲 線 血清コレステロール | 糖 尿 病 型 212 mg/dl | 糖 尿 病 型 206 mg/dl | 正 常 290 mg/dl | 糖 尿 病 型 361 mg/dl | 糖 尿 病 型 307 mg/dl | 境界糖尿病型 173 mg/dl |
| 骨 所 見 | 正 常 | 正 常 | 骨粗鬆症,病的骨 折後の肋骨,脊椎 骨,骨盤の変形 | 骨粗鬆症,病的骨 折後の肋骨,脊椎 骨の変形 | 骨粗鬆症,病的骨 折後の骨盤の変形 | 骨粗鬆症(軽度) |
| そ の 他 | 尿路 結 石 | 筋力低下,多血症 心室性期外収縮 | 尿 路 結 石 | 多 血 症 | ||
| 下垂体副腎機能 | ||||||
| 尿 中 170HCS | 12~20 mg/day | 10~15 mg/day | 10~12 mg/day | 20~22 mg/day | 17~20 mg/day | 27~30 mg/day |
| 17KS | 4~ 7 mg/day | 3~ 6 mg/day | 2~ 4 mg/day | 17 mg/day | 27~29 mg/day | 46~60 mg/day |
| ACTH テ ス ト | 増 加 | 増 加 | 増 加 | 不 変 | 不 変 | 不 変 |
| デキサメサゾン負荷 (2 mg, 8 mg) | 不 変 | 不 変 | 不 変 | 不 変 | 不 変 | 不 変 |
| 血漿コーチゾール | 20 μg/dl | 22~24 μg/dl | 18~20 µg/dl | 12~19 µg/dl | 29~36 µg/dl | |
| 摘 出 腫 瘍 重 量 組織 像 | 13.3 g adenoma | 8.5 g adenoma | 8.0 g adenoma | 10.0 g black adenoma | 11.0 g black adenoma | 300 g carcinoma |
| 診 断 ま で の 病 名 | 糖 尿 病 | 特発性血小板減少 性紫斑病(ステロ イド剤服用) | 蜘蛛膜下出血,高 血圧症 | 高 血 圧 症 | ||
Silber 法20),尿中 17KS は Drekter 法2),血漿 cortisol は, Rudd 法16) (症例1,2, 4, 5, 6),お よび competitive binding assay (症例3)で測定した. ACTH test は,合成 β1-24ACTH (“Cortro- syn”, Organon) 0.25 mg または 0.75 mg(症例1,3,4,5, 6)あるいは highly-purified ACTH (Organon) 100 u (症例2)を, 500 ml 生理食塩水とともに 8時間点滴静注を行ない,尿中 170HCS 値 を指標として ACTH 反応性を判定した.
(2) 腫瘍を用いる試験管内実験
患者より摘出した腫瘍は、組織学的に検索するとともに、その一部を試験管内実験に供した、 すなわち, 上記6例のうち,症例1(ACTH 反応性腺腫),4(ACTH 不反応性腺腫),6(癌腫)から手術により摘 出された副腎皮質腫瘍を用いて,以下に述べる実験を行なつた. なお,Sprague-Dawley 系雄ラット(130~ 150 g) の副腎を使用して同様の実験を行ない,ヒトにおける成績と対照した.
(a) 腫瘍切片による実験
手術により摘出された腫瘍を,すみやかに,厚さ 0.30.5 mm,重さ 70150 mg の薄片に切り, glucose
200 mg/dl を含む Krebs-Ringer bicarbonate buffer (pH 7.4) の中で, 95% O2, 5% CO2 ガス相下に
37℃,60分,振盪させつつ preincubation を行なつた後、 合成 β1-24ACTH (“Cortrosyn”, Organon)
0.5 mg/ml, cyclic AMP (興人試薬)3mM,または cycloheximide (和光純薬) 10 μM を含む上記と同
じ medium 5ml に切片を 移し,同様の 条件下に 60120 分 incubate した. 一方, ラットに おいて,
dexamethasone 0.45 mg を下肢の筋肉に注射し,4時間後,40 mg hexobarbital soda 腹腔内注射により
麻酔し, 副腎を摘出, 4つに切り,各切片で 腫瘍切片の 場合と同様に 反応を 行なわせた. 反応終了後,
medium 中に放出された cortisol (ラットの場合は corticosterone) を, Guillemin4) の方法に準じた硫酸
蛍光法で測定した. なお、それぞれの 条件下における実験回数は,各35 であり, mean±S.E. を求め
た.
(b) 腫瘍ミトコンドリア分画による実験
摘出された腫瘍の一部(12g)または, dexamethasone 前処置を加えたラットの副腎を細分した後,
4℃ で 0.25 M sucrose 液とともに軽く homogenize し, 600 g 20分間遠心分離し,上清にさらに 10,000
g 20分間遠心操作を加え,得られた pellet を,同溶液で2回洗滌してミトコンドリア分画とした. この分
画を用い,cholesterol-4-14C (RCC Amersham) を基質としてステロイド合成を行なわせた、すなわち,
20 mM tris-HC1 buffer (pH 7.4), 11.5 mM NaCl, 15.4 mM KC1, 70 mM sucrose, 1% bovine albumin,
10 mM Sod. Succinate を含む medium 0.3 ml に, cholesterol-4-14C (0.30.5 μCi, 614μM)および
ミトコンドリア分画 (0.21.0 mg protein) を加え,37℃,30分振盪しつつ反応させた、 この場合の cyclic
AMP (3mM)添加の影響を観察した. 反応終了とともに, 以後の操作における 回収率から 測定値を補正
するため, pregnenolone-7α-3H, progesterone-7α-3H (ともに RCC Amersham) 各々 10muCi および
それぞれの純品(pregnenolone: 東京化成, progesterone : Sigma) 各 100μg を含む methanol 溶液
0.5 ml を加え,生成されたステロイドを、著者のすでに報告した方法5)の如く,抽出,薄層クロマトグラフ
ィー2回による純化を行ない、その放射能を液体シンチレーションカウンター(Nuclear Chicago Mark I)
で測定した.
ミトコンドリア分画の蛋白量測定は, Lowry12) の方法で行なつた.
成 績
(1) 臨床的ならびに組織学的観察
各症例の ACTH 静脈内投与によるステロイド増加反応は Fig. 1 の如くである. 症例13は, ACTH
に反応し,症例46では反応はみられなかつた、 さらに,症例4,5 では, ACTH を通常の3倍量負荷
しても反応は認められなかつた. 摘出した腫瘍の組織像は,症例1~5 は腺腫,症例6は癌腫であつた. 腺
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腫のうち, ACTH 反応性のみられた症例1~3 の腫瘍は 外観上黄色を示したのに対し, ACTH 不反応性の症例 4,5 の腫瘍は,表面,割面と も,暗褐色ないし黒色の外観を呈し,病理組織学 的にも,“black adenoma’21) と考えられた. 光 学顕微鏡による組織像は、異型性のきわめて少な い均一な eosin 好性の compact cell よりなり, 多量の 細胞内色素 顆粒を 含んでおり, melanin 漂白法で漂白され、鉄染色に 陰性であることか ら, lipofuscin 顆粒と考えられる(Fig. 2). こ の black adenoma 症例4,5は, ACTH 反応 性腺腫にくらべて,臨床症状においても,皮膚赤 色線条,骨粗鬆症による病的骨折,多毛等の症状 が著明であり,検査上も尿中 17KS 値が反応性腺 腫に比して高値を示すなどの特徴が認められた.
(2) 各腫瘍切片における ACTH, cyclic AMP の効果
摘出した腫瘍切片の試験管内ステロイド合成に 及ぼす ACTH の効果は, Fig. 3 の如く,臨床 的に ACTH に反応を認めた症例1 の腺腫は試験 管内でも ACTH に反応性を示し,臨床上,無反 応であつた症例4 の腺腫(black adenoma) は,
ACTH
0.25mg
H.P. 100u 0
0.25mg
♡
0
Adenoma (1)
(2)
(3)
mg/
7day
20-
17OHCS
-
-
ACTH
0.25mg 0.75mg
0.25mg 0.75mg 0
Black (4)
▽
▽
(5)
▽
Adenoma
17OHCS
10 -
-
ACTH 0.25mg
0
Carcinoma (6)
20-
17 OHCS
.
-
150
… ACTH ~- Cyclic AMP
F/hr
B/hr
F/ 2hrs
F/hr
2.
pg/ gm tissue
100
PS.005
P <. 05
P <. 005
P<025
50
20-
1-
P‹.005
50
+
N.S.
Normal (Rat)
Adenoma ( case 1)
Black Adenoma ( case 4 )
Carcinoma ( case 6)
B
Cycloheximide P <. 02
100
F
50
P <. 01
ug /gm tissue / 2 hrs
F
F
50
5
50-
25-
Normal (Rat)
Adenoma ( case 1)
Black Adenoma ( case 4)
Carcinoma ( case 6)
in vitro でも, ACTH に反応しなかつた. これに対し,症例6 の副腎癌は, ACTH 負荷試験では、その ステロイド産生は、ほとんど ACTH に影響されなかつたが、試験管内のステロイド合成は, ACTH の添 加により,有意に抑制される成績が得られた.
一方, cyclic AMP に対しても, 各腫瘍切片は,ACTH に対して示した反応と、 ほぼ同じ反応を示し た.
| Adenoma (case 1) | Black adenoma (case 4) | Carcinoma (case 6) | |
|---|---|---|---|
| µg/g tissue/120 min | ug/g tissue/120 min | µg/g tissue/60 min | |
| control | 45± 3.3 | 57±9.0 | 2.43±0. 07 |
| ACTH | 86± 7.5* | 52±0.5 | 1.98±0.13 ** |
| cyclic AMP | 76±15.5 | 33±1.3 ** | 1.79±0.08* |
| pg/g tissue/120 min control 5. 34±0.23 | |||
| cycloheximide | 46± 5.8 | 26±4.1 | 4.36±0.24 |
| cycloheximide+ACTH | 43± 3.8 | 28±4.8 | 3.52±0.09 ** |
| cycloheximide+ cyclic AMP | 41± 1.1 | 16±1.1 | 3.10±0.39 ** |
Concentration of ACTH, cyclic AMP and cycloheximide were 0.5 mg/ml, 3 mM and 10 AM, respectively. The data represent the mean±S.E. of quadricate samples. * p<0.005, ** p< 0.05 for the difference from the corresponding control value.
(3) 各腫瘍切片のステロイド合成に対する cycloheximide の作用
Fig. 4 に示す如く,ACTH に反応する症例1 の腺腫は, ACTH, cyclic AMP の非添加時において, そのステロイド産生は cycloheximide により全く影響されなかつた. 一方, ACTH 不反応の症例 4の黒 色腺腫は,この薬剤により,ステロイド合成が著明に抑制された. また, in vitro で ACTH によりステ ロ イド産生抑制を受けた症例6 の癌腫切片も, cycloheximide によりステロイド合成が低下する所見が得 られた.
各腫瘍における ACTH, cyclic AMP の作用 に対する cycloheximide の効果は, Table 2 の 如く, ACTH 反応性腺腫では, ACTH, cyclic AMP によるステロイド合成促進が, cyclohexi- mide により対照のレベルに抑制された. 同様の 現象は,正常ラット副腎においても認められた. (図表なし). ACTH 不反応性腺腫では, cyclo- heximide の存在下では,ステロイド合成レベル が全般に低下するのみで, ACTH, cyclic AMP に対する不反応性は 変らず,癌腫では, ACTH, cyclic AMP に対する ステロイド合成 抑制反応 は,cycloheximide 添加時の ステロイド産生が 低下した状態でも認められた.
(4) ミトコンドリア分画のステロイド産生能に 及ぼす cyclic AMP の効果
本実験で用いられた 実験条件下では, choles- terol からの生成物として, pregnenolone およ び progesterone が認められたが、後者は前者に くらべて量的に ごくわずかであつたので, pre- gnenolone の値のみでステロイド合成を 判定し た. Fig. 5 は正常対照として用いたラット副腎ミ
cpm (x103)
15
10
5
10
30
60
min.
| (mu moles/g protein/30 min) | |||
|---|---|---|---|
| control | cyclic AMP | ||
| Normal (rat) | 152±9.0 | 202±10.2 | p<0. 01 |
| Adenoma (case 1) | 57±1.4 | 63± 0.6 | p<0. 005 |
| Black adenoma (case 4) | 127±3.2 | 121± 0.6 | N.S. |
| Carcinoma (case 6) | 93±5.2 | 57± 4.2 | p<0. 005 |
Concentration of cyclic AMP was 3 mM. The data represent the mean+S.E. of quadricate samples. p value is for the difference from the corresponding control. N.S. = not significant.
トコンドリア分画による pregnenolone 合成の時間的経過を示したものである. 反応開始から60分間,ほ ぼ直線的にステロイド合成がみられるため,30分における値をとり比較した. 腫瘍細胞のミトコンドリア分 画の cyclic AMP に対する反応性は, Table 3 にみられる如く, cyclic AMP に対し,症例1 の腺腫で は pregnenolone 合成増加,症例4の黒色腺腫では反応欠如,症例6の癌腫では pregnenolone 合成抑制 と、いずれも各腫瘍切片のステロイド産生における ACTH, cyclic AMP に対する反応と一致した反応態 度を示した.
考 察
臨床上 Cushing 症候群を呈する副腎皮質腫瘍において、同じように下垂体の支配を全く受けず、ホルモ ンを自律的に分泌しながら, ACTH, cyclic AMP および cycloheximide に対する反応態度がさまざまな ものがあることは、それぞれの腫瘍におけるホルモン産生分泌機構,あるいは、その ACTH に対する反応 機構を推察する上に興味深い問題である、 さらに、組織学的には同じ腺腫の分類に入れられる腫瘍のうちで も,これら機能面における反応動態にちがいの存在することは、疾病の臨床像の相違と関連し,さらには腫 瘍そのものの本質を反映するものであるかも知れないとも思われる.
臨床成績によつて判断された ACTH 反応性腺腫は, in vitro の実験でも ACTH, cyclic AMP に反応 し, ACTH 不反応性腺腫では、試験管内に添加した ACTH のみならず, cyclic AMP に対しても,全く ステロイド増加反応を示さなかつた. このように、臨床上認められた ACTH 反応性が,腫瘍切片の ACTH に対する反応態度にあらわれ、さらに、腫瘍切片およびミトコンドリア分画の cyclic AMP への反応性に そのまま再現されている. この成績は、これら副腎皮質腫瘍の場合も,ACTHに反応するにあたり, cyclic AMP が ACTH 作用を伝達する可能性を示すものと考えられ,また、腫瘍の ACTH 反応異常に関して, cyclic AMP への反応性の異常が少なくとも要因の一つを構成することを示すものと思われる。 さらに,ミ トコンドリア分画における cyclic AMP の作用点にも異常の存在することが示唆される.
すでに, ACTH に反応しない腫瘍は以前から注目され、そのホルモン反応機構について、いろいろ検索 が加えられている. 例えば,ラット副腎癌スライスを用いた実験で, ACTH による cyclic AMP 合成が 低下し,さらに外因性の cyclic AMP もステロイド産生を促進しないため, cyclic AMP の合成のみなら ず、その作用機構の異常も示唆されている14).
一方, ACTH 反応性腺腫においては, ACTH, cyclic AMP,さらには cycloheximide に対する反応性 が、すべて正常副腎と同じ 傾向を示した。 しかし,正常副腎が全く ACTH 依存性であり,血中 ACTH 濃度が低下すると,たちまちステロイド産生の減少のみならず,副腎重量の低下,さらに萎縮をも来すのに 反し,この腺腫は, ACTH には反応性を保ちつつも, ACTH のほとんどない条件で増殖し,ホルモン産生
を行なつている点に明らかな相違が認められる.
副腎癌の ACTH に対する 反応は,臨床的には 全く認められ なかつたが, 試験管内 実験に おいては, ACTH, cyclic AMP によりステロイド産生が低下することが認められた. この in vivo と in vitro の 成績の解離は、実験条件において, ACTH が血中におけるよりはるかに高濃度であつたためと考えられる が,臨床上,患者の状態の変動のため,はつきり効果を認識出来なかつたためかも知れない.
ACTH, cyclic AMP の添加により, 副腎癌組織の ステロイド産生の低下がみられることについては, 種々の要因を考慮しなければならない. ACTH や cyclic AMP がステロイド合成過程を抑制するという 成績は、少なくとも実験動物の副腎癌において知られている。 すなわち, Sharma ら18) は、 ラット副腎癌に よる実験において, pregnenolone から desoxycorticosterone や corticosterone への転換が,これらの 添加によつて阻害されたことを報告した。 しかし、ヒトの材料における観察は本報告が最初と思われる. 一 方,自律性をもつて増殖を続ける癌組織は、一般に、その細胞機能においても、もとの細胞のもつていた働 きを失い, 形態学的にも異常を示すが, cyclic AMP はこの癌細胞を機能的にも形態的にも正常化する場 合のあることが,癌化した fibroblast を用いた実験などで示されている919). Masui ら13)は, cyclic AMP が正常副腎に対しては DNA 合成促進的に働くのに,副腎腫瘍細胞では, DNA 合成が cyclic AMP によ つて抑制される成績を示し, cyclic AMP が細胞の分化や細胞分裂を調節し, 腫瘍細胞においては,これ を正常細胞に変化させるように働くことを示唆した. 著者らの用いた癌組織における自律性のホルモン産生 機構の詳細は勿論不明であるが,そのステロイド産生反応の自律的な亢進が, cyclic AMP によりある程 度正常化の方向へ転換し、結果的には“抑制”という形をとつたと考えることも出来るかも知れない.
著者らの 用いた 不反応性 腫瘍では, 蛋白合成 阻害剤の一種である cycloheximide を作用 させると, ACTH, cyclic AMP にも増加しない自律的なステロイド合成が著明に抑制された、 ACTH のステロイド 合成促進作用機構に対する cycloheximide の効果の意味については、なお議論のある11)ところではあるが この薬剤が ACTH 作用の何らかの 段階を抑制する3) ことから 推論すると、 これらの 腫瘍に おいては, ACTH の存在しない条件でも、すでに刺激された状態であることが考えられる. Schorr ら17は彼らの用い たラット副腎癌において, adenyl cyclase が ACTH のみならず epinephrine, norepinephrine, TSH などによつて刺激されることを示し、ある種の副腎腫瘍では,細胞膜のホルモン受容体が特異性を失ったた め, ACTH 以外のホルモンによつて腫瘍のステロイド産生が活性化されている可能性を示した. 著者らの 用いた ACTH 不反応性腫瘍において, cyclic AMP により賦活されるステロイド合成機構が、きわめて 活動的な状態にある原因を考える上で、他のホルモンの関与する以上の説を適用することもあるいは可能で あるかも知れない. いずれにせよ,ステロイド産生機構がすでに極大に活動し、添加した cyclic AMP が 働く余地がないことが, ACTH 不反応性の一因と判断される.
以上の臨床検査および試験管内実験において観察された,各腫瘍の ACTH に対する反応性の相違を来す 根源に関する考察は以上の如くであるが,さらに我々は、腫瘍の成長速度が, ACTH 反応性と何らかの相 関関係にあるのではないかと考えている8、 我々の示した Cushing 症候群を来す副腎皮質腫瘍6例におい て、腫瘍重量を、症状発現から摘出までの推定年月数で除して粗成長率を算出すると、成長率の小さいもの に ACTH 反応性が保たれている傾向が認められた。 すなわち、成長速度の遅い,おだやかな経過をとるも のほど,正常副腎に近い ACTH 反応性やステロイド産生パターンを保ちつつ成長し,一方,急速に成長す る腫瘍では、その機能面においても, ACTH 不反応など、正常副腎とかなり異なる状態を来していること が推察される. また、我々の経験した ACTH 不反応性腺腫 2例は,いずれも,病理組織学的に記載されて いる “black adenoma”21) に一致する形態学的所見を呈したが,これらの腫瘍は、それ以外の ACTH に 反応する腺腫に比較して,成長率が大きいだけではなく、臨床症状においても,骨の変化など、症状が重篤 であり,検査所見でも,17KS が高値を示すなどの特徴がみられた. これに対し, ACTH 反応性腺腫では, 症例1,2にみられる如く,一般に症状も軽度であり,17KS も低値であつた. なお,症例3は,この範疇 に入る腺腫症例であるが、かなり重篤な症状を呈した。 しかし,病歴を検討すると,他の疾患と誤診され,
長期にわたり大量のコルチコイド剤を服用しており,人為的な Cushing 症状が大きく加味されていた可能 性が強い. この推論を裏づける如く 17KS は低値であつた. これら腺腫における,ACTH 反応性と,組 織像,臨床症状,17KS 値との関連性については、著者らの数少ない症例のみでは、結論を下すには早計に 過ぎると思われるが,今後,症例の集積により検討が進められることが望まれる.
文 献
1) Birmingham, M.K., Elliot, F.H. and Valere, P.H.L. : The need for the presence of calcium for the stimulation in vitro of rat adrenal glands by adrenocorticotrophic hormone. Endocrino- logy, 53: 687-689, 1953. 2) Drekter, I.J., Heisler, A., Scism, G. R., Stern, S., Pearson, S. and McGavack, T.H. : The determination of urinary steroids I, The preparation of pigment- free extracts and a simplified procedure for the estimation of total 17-ketosteroids. J. Clin. Endocrinol. Metab., 12: 55-65, 1952. 3) Garren, L.D., Ney, R.L. and Davis, W.W .: Studies on the role of protein synthesis in the regulation of corticosterone production by adrenocorticotropic hormone in vivo. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A., 53 : 1443-1450, 1965. 4)
Guillemin, R., Clayton, G.W., Lipscomb, H.S. and Smith, J.D. : Fluorometric measurement of rat plasma and adrenal corticosterone concentration. J. Lab. Clin. Med., 53 : 830-832, 1959. 5) 長谷川恭一,森脇 要:副腎ミトコンドリアのステロイド合成に及ぼす cyclic AMP, Ca++ の効果, 日內分泌会誌,49, 151, 1973. 6) Haynes, R. C. Jr. and Berthet, L. : Studies on the me- chanism of action of the adrenocorticotropic hormone. J. Biol. Chem., 225 : 115-124, 1957. 7) Haynes, R.C. Jr., Sutherland, E.W. and Rall, T.W .: The role of cyclic adenylic acid in hor- mone action. Recent Progr. Hormone Research., 16: 121-138, 1960.
菅瀬 透,長谷川恭一,川上房男,西川光夫:副腎皮質腫瘍における ACTH 反応性と臨床的ならびに組織 学的性格との関連,最新医学, 30: 517-519, 1975. 9) Johnson, G.S., Friedman, R. M. and Pastan, I. : Restoration of several morphological characteristics of normal fibroblasts in sarcoma cells treated with adenosine-3’ : 5’-cyclic monophosphate and its derivatives. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A., 68 : 425-429, 1971. 10) Karaboyas, G.C. and Koritz, S.B .: Identity of the site of action of 3’ : 5’-adenosine monophosphate and adrenocorticotropic hormone in corticosteroido- genesis in rat adrenal and beef adrenal cortex slices. Biochemistry, 4: 462-468, 1965. 11)
8) 五十嵐暢,森脇 要,
Kowal, J. : Adrenal cells in tissue culture. VII. Effect of inhibitors of protein synthesis on ste- roidogenesis and glycolysis. Endocrinology, 87: 951-965, 1970. 12) Lowry, O.H., Rose-
brough, N.J., Farr, A.L. and Randall, R.J. : Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 193 : 265-275, 1951. 13) Masui, H. and Garren, L.D. : Inhibition of repli- cation in functional mouse adrenal tumor cells by adrenocorticotropic hormone mediated by adenosine 3’: 5’-cyclic monophosphate. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A., 68 : 3206-3210, 1971. 14)
Ney, R.L., Hochella, N.J., Grahame-Smith, D.G., Dexter, R.N. and Butcher, R.W. : Abnormal regulation of adenosine 3’, 5’-monophosphate and corticosterone formation in an adrenocortical carcinoma. J. Clin. Invest., 48 : 1733-1739, 1969.
15) Peron, F.G. and Koritz, S.B .: On the exogenous requirements for the action of ACTH in vitro on rat adrenal glands. J. Biol. Chem., 233 : 256-259, 1958. 16) Rudd, B.T., Sampson, P. and Brooke, B.N. : A new fluori- metric method of plasma cortisol assay with a study of pituitary-adrenal function using metyra- pone (SU 4885), J. Endocrin. 27 : 317-325, 1963. 17) Schorr, I. and Ney, R.L. : Abnormal hormone responses of an adrenocortical cancer adenyl cyclase. J. Clin. Invest., 50: 1295-1300, 1971. 18) Sharma, R.K .: Metabolic regulation of steroidogenesis in adrenocortical car-
cinoma cells of rat. Eur. J. Biochem., 32 : 506-512, 1973. 19) Sheppard, J.R. : Restoration of contact-inhibited growth to transformed cells by dibutyryl adenosine 3’ : 5’-cyclic monophos- phate. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A., 68 : 1316-1320, 1971. 20) Silber, R.H. and Porter, C. C. : The determination of 17, 21-dihydroxy-20-ketosteroids in urine and plasma. J. Biol. Chem., 210: 923-932, 1954. 21) Symington, T. : Functional Pathology of the Human Adrenal Grand. E. and S. Livingstone Ltd., Edinburgh and London, 1969, p. 82, 122-123.